第4章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备–临床免疫学检验（中级）

一、A1 
1、阳性杂交瘤细胞常用的保存方法是（）。
A、4℃冰箱保存
B、37℃保存
C、-20℃保存
D、-30℃保存
E、液氮（-196℃）保存
2、培养骨髓细胞时为避免返祖，定期用于处理细胞的是（）。
A、PEG 
B、TK 
C、8-AG 
D、HAT 
E、ConA 
3、制备单克隆抗体时为获得经过抗原免疫的B细胞通常采用（）。
A、B细胞体外培养
B、小鼠腹腔内接种抗原
C、大白鼠体内接种抗原
D、小鼠肌肉内接种抗原
E、小鼠皮下注射B细胞
4、能在HAT培养基生长繁殖的细胞是（）。
A、小鼠脾细胞
B、小鼠骨髓瘤细胞
C、饲养细胞
D、杂交瘤细胞
E、以上都可以
5、免疫治疗中，同时具有特异性结合Tc和肿瘤细胞的抗体是（）。
A、单链抗体
B、人源化抗体
C、双价抗体
D、嵌和抗体
E、双特异性抗体
6、单克隆抗体制备过程中用于阻断瘤细胞通过正常途径合成DNA的化合物是（）。
A、次黄嘌呤
B、胸腺嘧啶核苷
C、叶酸
D、聚乙二醇
E、甲氨蝶呤
7、人源化抗体是（）。
A、由鼠抗体的Fc与人抗体的Fab组成
B、由鼠体内编码人抗体的基因指导合成的抗体
C、由2个相串联的人抗体Fab段连接而成
D、用鼠抗体CDR嵌如人抗体可变区而成
E、完全的人体合成抗体
8、制备单克隆抗体常选用小鼠的哪类细胞作为饲养细胞（）。
A、中性粒细胞
B、K细胞
C、肥大细胞
D、成纤维细胞
E、腹腔细胞
9、单克隆抗体的应用不包括（）。
A、肿瘤的诊断
B、肿瘤的定位
C、血清Cl-含量测定
D、激素水平检测
E、抗原物质的提取及纯化
10、单克隆抗体制备时作为细胞融合剂的是（）。
A、HAT 
B、PEG 
C、TK 
D、DNA 
E、ConA 
答案部分
________________________________________

一、A1 
1、
【正确答案】 E 
【答案解析】克隆化培养后的阳性杂交瘤细胞应及时冻存，最好保存在-196℃液氮中。
2、
【正确答案】 C 
【答案解析】细胞在传代过程中，部分细胞可能有返祖现象，应定期用8-氮鸟嘌呤（8-AG）进行处理，使生存的细胞对HAT呈均一的敏感性。
3、
【正确答案】 B 
【答案解析】制备单克隆抗体时，可采用动物体内诱生方法：先在小鼠腹腔注射液体石蜡或福氏不完全佐剂，一周后将杂交瘤细胞悬液注射腹腔，1～2周后，无菌抽取腹水，离心取上清液即可。
4、
【正确答案】 D 
【答案解析】细胞融合的选择培养基中有三种关键成分：次黄嘌呤（H）、甲氨蝶呤（A）、胸腺嘧啶核苷（T），所以取三者的字头称为HAT培养基。只有融合细胞具有亲代双方遗传性能，才能在HAT培养基上长期存活与繁殖，如杂交瘤细胞。
5、
【正确答案】 E 
【答案解析】双特异性不同的两个小分子抗体连接在一起可得到双特异性抗体。双特异性抗体能同时结合两种抗原，因而可介导标记物与靶抗原结合或某些效应因子定位于靶细胞，在免疫学检测中可简化操作步骤，提高检验质量；应用双特异性抗体介导的药物杀伤效应可用于肿瘤等的治疗。
6、
【正确答案】 E 
【答案解析】甲氨蝶呤（A）是叶酸的拮抗药，可阻断瘤细胞利用正常途径合成DNA。
7、
【正确答案】 D 
【答案解析】人源化抗体主要指鼠源单克隆抗体以基因克隆及DNA重组技术改造，重新表达的抗体，其大部分氨基酸序列为人源序列取代，基本保留亲本鼠单克隆抗体的亲和力和特异性，又降低了其异源性，有利于人体。
8、
【正确答案】 E 
【答案解析】制备单克隆抗体常选用小鼠的腹腔细胞作为饲养细胞。先在小鼠腹腔注射液体石蜡或福氏不完全佐剂，一周后将杂交瘤细胞悬液注射腹腔，1～2周后，无菌抽取腹水，离心取上清液即可。
9、
【正确答案】 C 
【答案解析】单克隆抗体在医学中用于：①作为诊断试剂，用于诊断各类病原体，目前这是McAb应用最多的领域之一；②肿瘤特异性抗原和相关抗原的检测。用于肿瘤的诊断、分型及定位；③检测淋巴细胞表面标志物，用于区分细胞亚群和细胞分化阶段；④抗原微量成分的检测及对酶类、激素、维生素、药物等的检测；⑤在防治工作中如恶性肿瘤的治疗，“生物导弹”的研制等都有广泛前景；⑥研究工作中用作“探针”，确定大分子生物物质在细胞中的分布及位置；⑦用于抗原物质的提取及纯化。
10、
【正确答案】 B 
【答案解析】单克隆抗体制备时最佳的融合效果应是最低程度的细胞损伤而又产生最高频率的融合。聚乙二醇（PEG1000～2000）是目前最常用的细胞融合剂，一般应用浓度为40%（W/V）。

hanS?ot???rial;mso-bidi-font-family:Arial'>【答案解析】用不同饱和度的硫酸铵或硫酸钠，可将组织溶液分成若干组分。最常用的盐析剂为33～50%的硫酸铵。

6、
【正确答案】 E 
【答案解析】如各种细胞、细菌、寄生虫等皆为颗粒性抗原。细菌外毒素不属于颗粒性抗原。
7、
【正确答案】 D 
【答案解析】与抗原同时或预先注射于机体能增强机体免疫应答或改变免疫应答类型的辅助物质称免疫佐剂，具有免疫原性的佐剂是天然的佐剂，如卡介苗、百日咳杆菌、脂多糖、细胞因子。
8、
【正确答案】 A 
【答案解析】福氏佐剂分完全福氏佐剂和不完全福氏佐剂两种。佐剂和抗原比例为1:1。
9、
【正确答案】 C 
【答案解析】盐析法分离蛋白质的原理是破坏蛋白质水化膜而改变其溶解度。
10、
【正确答案】 C 
【答案解析】某物质在独立存在时只具有反应原性而无免疫原性，这些物质称为半抗原。如一些分子量小于4000的有机物质，如多肽、大多数的多糖、甾族激素、脂肪胺、类脂质、核苷、某些小分子量的药物等。半抗原与蛋白质载体或高分子聚合物结合后才有免疫原性。
11、
【正确答案】 A 
【答案解析】木瓜酶可将IgG裂解成2个Fab片段及1个Fc段。
12、
【正确答案】 D 
【答案解析】半抗原在独立存在时只具有反应原性而无免疫原性。如多肽、大多数的多糖、甾族激素、脂肪胺、类脂质、核苷、某些小分子量的药物等。
13、
【正确答案】 C 
【答案解析】自抗体中提取纯化IgG常用的方法有：离子交换层析法、凝胶过滤法、亲和层析法、酶解法。
14、
【正确答案】 D 
【答案解析】纯化抗原的鉴定：主要对纯化抗原的含量、理化性质、纯化及免疫活性进行鉴定，常用方法有酚试剂法、聚丙烯酰凝胶电泳法、免疫电泳法、免疫双扩散法等。
15、
【正确答案】 C 
【答案解析】动物血采集后，室温自然凝固后立即分离出血清，妥善保存。抗血清保存有三种方法：①第一种是4℃保存，通常可保存3个月～半年，效价高时可保存1年左右；②第二种是-20～-40℃低温保存，可保存5年左右，但需防止反复冻融；③第三种是真空冰冻干燥保存，可保存5～10年。
二、B 
1、
<1>、
【正确答案】 B 
【答案解析】凝胶过滤又称分子筛层析。通过凝胶分子筛作用，可将大、中、小三类分子分开，选择凝胶柱时应注意选用适于分离范围内的凝胶。
<2>、
【正确答案】 D 
【答案解析】免疫固定电泳：类似免疫电泳，将待测血清或体液标本在琼脂平板上作区带电泳，分离后于其上覆盖抗。轻链或各类重链的抗血清滤纸，当抗体与某区带中的单克隆免疫球蛋白结合后，便形成复合物而沉淀，再漂洗、染色，呈现浓而狭窄的着色区带，可判断单克隆免疫球蛋白的轻链和重链型别，如多发性骨髓瘤中单克隆免疫球蛋白重链和轻链。