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瑞氏染色
发布时间：2014/08/16 检验基础 浏览次数：649 欢迎阅读！
瑞氏（ Wright ' s staim ；美蓝－伊红Y）染色：
1 ．瑞氏染料是由碱性染料美蓝（ Methvlem blue ）和酸性染料黄色伊红（ Eostm Y ）合称伊红美蓝 染料即瑞氏
（美蓝－伊红Y）染料。
伊红钠盐的有色部分为阴离子，无色部分为阳离子，其有色部分为酸性，故称伊红为酸性染料。美蓝通常为氯盐是碱性的，美蓝的中间产物结晶为三氯化镁复盐，其有色部分为阳离子，无色部分为阴离子，恰与伊红钠盐相反。
2 ．用 甲醇作瑞氏 染料溶剂，即成瑞氏染液。甲醇是瑞氏染料良好溶剂，有两种作用：
（ 1 ）甲醇使瑞氏染料中美蓝（ M ）与伊红（ E ）在溶液中离解，可使细胞成分选择性吸附其中的有色物质而着色。
甲 醇
ME （瑞氏染料）—— —— → M + + E –
在配制的瑞氏染液中美蓝如放置过久即可氧化而含有天青，美蓝天青与伊红化合物能使核染成紫红色，但不能使胞浆染为蓝色，多余 美蓝就可以
使胞浆染成蓝色，染色主要是化学作用，是离子彼此结合的反应。
（2）甲醇具有强大的脱水力，可将细胞固定在一定形态及增加细胞结构的表面积，提高细胞对染料吸收作用，同时由于甲醇吸附染色液中的水，使染色液升温，加速染色反应。
3. 瑞氏染液配制：
(1) 瑞氏染液配制（Ⅰ液）：
瑞氏染料 1g
甲醇（ AR 以上） 600ml
甘油 15ml
先称干燥（事先放入温箱干燥过夜）瑞氏染料放置乳钵内， 用乳棒轻轻 敲碎染料成粉末，再行研磨至听不到 研芝麻声
即呈细粉末，加少许甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸内显“一面镜”光泽，而无染料粉粒沉着，再加较多量甲醇研磨呈一面镜光亮，静置片刻，将上层液体倒入
一
清洁储存瓶内（最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重复数次，直至乳钵内染料及甲醇用完为止，摇匀，密封瓶口，存室温暗处，储存愈久，则染料溶解、分解就越好，一般储存
3 个月以上为佳。
(2) 缓冲液（Ⅱ液）：
1) 缓冲液作用：染色对氢离子浓度是十分敏感的，据观察 pH 值的改变，可使蛋白质与染料形成的化合物重新离解。 缓冲液须保持
一定的 pH 使染色稳定， PBS 的 pH 一般在 6.4~6.8 ，偏碱性染料可与缓冲液中 酸基起
中和作用，偏酸性染料则与缓冲液中的碱基起中和作用，使 pH 恒定。
●缓冲液配制（pH6.4~6.8，弱酸性）<本配方仅用作瑞士染色的Ⅱ液用>：
| 配方： |
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KH2PO4（无水） 6.64g |
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Na2HPO4（无水） 2.56g |
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用少量蒸馏水溶解后,加H2O(新鲜)至1000ml |
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注：本红色字迹资料来自《临床检验基础实验指导》第二版，刘成玉 主编 2005年11月印刷 P11 |
置室温黑暗处，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污染则应报废。
瑞士瑞士步骤（针对血涂片）：
1、涂片干透后，在涂片两端画线以防染液外溢，将涂片置于染色架上，滴加染液（Ⅰ液）3-5滴，使其迅速盖满血涂片，约0.5-1min后，滴加等量或稍多的缓冲液（Ⅱ液），轻轻摇动玻片或用吸球对准血涂片吹起，使染液充分混合。
2、冲洗：染色5-10min后用流水冲洗染液，待干；镜检。
（注：本红色字迹资料来自《临床检验基础实验指导》第二版，刘成玉 主编 2005年11月印刷 P11）
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