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Latest Articles【微生物检验笔记】第18章 病原性球菌及检验(上)
病原性球菌
革兰阳性:葡萄球菌属、链球菌属、肺炎链球菌、肠球菌
革兰阴性球菌:奈瑟菌属
要着重注意:生物学性状–微生物学检查–致病性
形态结构:革兰染色、结构形态(球、杆、螺旋)、大小、排列状态、特殊结构(是否有)(是否有荚膜、芽孢、鞭毛、菌毛)
培养特性:对气体(对氧气和二氧化碳的要求:需氧、厌氧、兼性厌氧…)、营养(如培养基中最常提供的是血液或血清)、最适pH(一般在7.2-7.6)、最适温度(一般在35oC-37 oC )的要求,及在培养基中是生长现象(菌落特点:如TB呈菜花状;如细菌色素;葡萄球菌脂溶性色素;铜绿假单胞菌水溶性色素;一般溶血环:α溶血为不完全溶血-形成草绿溶血环,β溶血为完全溶血-形成透明的溶血环,γ溶血为不溶血;在液体培养基中的生长现象:如一般情况下需氧菌在液体表面生长,兼性厌氧菌在液体培养基中呈浑浊生长,厌氧菌呈沉淀生长,也有例外情况不过也不难理解,如兼性厌氧的链球菌属在液体培养基呈沉淀生长,是因为它是呈链状生长)
生化反应:记住某种细菌区别于其他细菌的特殊生化反应
抗原:
分类:
致病性:
致病性物质:如葡萄球菌肠毒素引起肠炎。
微生物学检查:针对生物学性状和致病性。
=====>检查程序:采集标本(后视标本而定)—直接涂片镜检(含杂质少的)、液体培养基增菌培养(体液、血、脑脊液)、接种选择性培养基里面来培养(含大量杂菌的标本)———培养出来之后的鉴定(生化、血清学方法、免疫学方法、分子生物学方法)
怎么样采集标本、采集什么标本要根据病变情况而定
直接涂片镜检:脓液、分泌物、血液
分离培养(视不同细菌的不同生物学性状和营养需求情况而定):
细菌鉴定:生化、血清学、动物试验、分子生物学方法
【普及共性、独记个性】
《葡萄球菌属》
共性:革兰阳性,葡萄串状排列、球菌、约1μm,
特性:无鞭毛,个别菌有荚膜
培养特性:需要或兼性厌氧,要求不高,普通琼脂平板生长,产生脂溶性色素(白色、金黄色、柠檬色色素)
在血琼脂平板:产αβγδ溶血,对人主要致病的是α溶血素
生化反应:(1)触媒试验(+) 而链球菌属触媒阴性;—-【鉴定点】
(2)分解甘露醇、能产生血浆凝固酶——是致病的葡萄球菌
抗原性:蛋白抗原(SPA)、多糖抗原(有A、B、C三种)
分类:根据色素来分:金黄色葡萄球菌、白色葡萄球菌、柠檬色葡萄球菌
根据能否产生血浆凝固酶来分、凝固酶阳性球菌(金黄色葡萄球菌)、凝固酶阴性葡萄球菌【CNS】(表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌)
抵抗力:对理化因素抵抗力强,耐热、耐干燥、耐高盐,是抵抗力最强的无芽孢细菌。
抵抗力最强的细菌(这里就不是金黄色葡萄球菌了):
致病性 :
凝固酶阳性的:
——–>金黄色葡萄球菌,
致病物质:血浆凝固酶、葡萄球菌溶血素、杀白细胞素、肠毒素、表皮溶解(剥脱)毒素、毒性休克综合征毒素
所致疾病:(1)毒素性疾病:肠毒素—-> 食物中毒、葡萄球菌性肠炎
表皮剥脱毒素—->烫伤样皮肤综合征
毒素休克综合征毒素—->毒性休克综合征
(2)侵袭性疾病:皮肤及软组织感染、全身性感染、呼吸道感染、医院内感染
表皮葡萄球菌:是存在于皮肤的正常栖居菌,是条件致病菌,是医院内感染的重要病原菌,是导致血培养污染主要的细菌之一。
腐生葡萄球菌:是导致尿路感染主要的病原菌之一
微生物学检查:
(1)标本采集:根据病变部位不同,可采集脓、渗出液、分泌物、血、尿、粪、痰、
(2)检验方法:
1)直接镜检: 镜下见到,可报告“疑为葡萄球菌”
2)分离培养:
1))血液标本:直接注入血培养瓶培养;【手工法操作:取5ml静脉血注入50ml葡萄糖肉汤或含硫酸镁肉汤增菌培养,迅速摇匀以防止凝固,35 oC培养24h后观察有无菌落生长,若均匀浑浊、溶血或胶胨状生长,则接种血琼脂进一步鉴定;若无菌生长,48-72小时观察,以7天为限,接种血琼脂,以确定无细菌生长。】
2))胆汁、尿道分泌物、脑脊液离心沉淀物:直接接种
3))粪便、呕吐物:接种高盐卵黄或高盐胆固醇琼脂平板,35 oC培养18-24小时后可形成细小菌落,48小时后形成较典型菌落。
3)鉴定试验:
金葡 | 表葡 | 腐生葡 | |
触酶 | + | + | + |
血浆凝固酶 | + | – | – |
甘露醇发酵试验 | + | – | – |
新生霉素敏感试验 | S | S | R |
报告:“检出XXXX葡萄球菌”
4)耐药性检测:
耐甲氧西林的金葡菌(MRSA)
耐甲氧西林的表葡菌(MRSE)
耐万古霉素的金葡菌(VRSA)
耐万古霉素的表葡菌(VRSE)
NCCLS/CLSI推荐用头孢西丁纸片法检测对苯唑西林耐药的葡萄球菌。