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    【微生物检验笔记】第11章 培养基

    培养基的组成成分:

    【营养物质】

    水、碳源、氮源、无机盐、生长因子

    ——-蛋白胨:提供氮源

    ——-肉浸液:提供氮源、碳源

    ——-牛肉膏:无糖,可做肠道杆菌鉴别培养基的基础成分

    ——-糖类、醇类:提供碳源,主要用于制备细菌鉴定培养基

    ——-血液:含大量营养物质、碳源、氮源、营养因子,还可以利用来观察溶血情况

    ——-无机盐类:对环境起缓冲作用,个别细菌在不同浓度无机盐下的生长情况不同

    ——-鸡蛋和动物血清:某些细菌生长必须,如吕氏血清用于白喉棒状杆菌培养

    ——-生长因子:需要量小,但是某些细菌生长必须

    【凝固物质】

    常用琼脂(是一种从石菜花中提取的一种半乳糖胶,温度达98摄氏度时可溶于水,温度在45摄氏度以下时可成凝胶状态),特殊情况下有用明胶、卵白蛋白、血清。

    【抑制剂和指示剂】

    出于选择、鉴定、判断结果的的需要。

    培养基的种类:

    ——–按用途来分:

    种类 作用 举例
    基础培养基 细菌的增菌、检验,也作其他培养基的基础成分 普通肉汤、普通琼脂平板
    营养培养基 供营养要求高或需要特殊生长因子的细菌生长 血琼脂平板、巧克力平板
    鉴别培养基

    在培养基内加入特定的作用底物和指示剂,由于不同细菌分解糖类或蛋白质不同或其代谢产物不同而出现不同反应现象来鉴别不同的细菌

    糖发酵管、KIA、伊红-美蓝琼脂、MIU培养基
    选择培养基

    在培养基中加入特定抑制剂抑制杂菌生长,有助于需要的选择性细菌生长

    SS培养基(培养肠道致病菌)
    厌氧培养基 培养专性厌氧菌 庖肉培养基、琉基乙醇酸钠培养基
    细菌L型培养基 针对细胞缺陷的细菌培养 高渗(3%-5%NaCL、10%-20%蔗糖或7%聚乙烯吡咯烷酮)低琼脂培养基

    ——–按性状来分:

    种类 作用 举例
    液体 增菌或接种纯菌以观察其生长表现 肉汤培养基
    半固体 观察动力、保存菌种 液体培养基中加入0.3%-0.5%的琼脂
    固体 用于 分离、纯化、鉴定、药敏 液体培养基中加入1.5%-2.0%的琼脂

     分离培养基的选择:

    ——–血平板:一般细菌检验标本的分离,适于各类细菌生长

    ——–巧克力平板:含有Ⅴ和Ⅹ因子,适于接种嗜血杆菌、奈瑟氏菌

    ——–中国蓝平板或伊红美蓝平板:肠道弱选择性培养基,由于发酵型革兰氏阴性杆菌分解乳糖能力不同而在此平板上菌落不同,便于鉴别菌种

    ——–麦康凯平板:中等强度选择性,抑菌力略强,少数革兰氏阴性菌不长,在麦康凯培养基上能否生长,是发酵菌鉴别的一个重要依据

    ——–SS琼脂:较强的抑菌力,用于志贺菌和沙门菌的分离,因选择性过强,使用时最好加一种弱选择性培养基给以配对互补

    ——–碱性琼脂或TCBS琼脂:用于从粪便中分离霍乱弧菌或其他弧菌【TCBS培养基:硫代硫酸盐、枸橼酸盐、胆盐、蔗糖琼脂培养基,用于霍乱(pH8.4-9.2)、副溶血性弧菌的分离培养。】

    ——–血液增菌培养基:用于从血液或骨髓中分离常见病原菌

    ——–营养肉汤:主要用于增菌

     【TCBS培养基补充】:

    配置:称取本品 8.9g,煮沸溶解于100ml 蒸馏水中,冷至 60℃时, 倾入无菌平皿 ,无需高压灭菌。

    成分(单位:g/L):酵母粉 5.0 , 蛋白胨10.0, 硫代硫酸钠10.0, 枸橼酸钠10.0, 牛胆粉5.0, 牛胆酸钠3.0 , 蔗糖20.0 , 氯化钠10.0, 柠檬酸铁1.0 , 麝香草酚兰0.04, 琼脂15.0, pH值8.6 ± 0.1,

    培养基原理及说明培养基中的蛋白胨、酵母浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;氯化钠可刺激弧菌的生长;蔗糖是可发酵的糖类;胆酸钠、牛胆粉、硫代硫酸钠和柠檬酸钠及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和大肠菌群;霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长;硫代硫酸钠与柠檬酸铁反应作为检测硫化氢产生的指示剂;溴麝香草酚兰和麝香草酚兰是pH指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。

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