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    【微生物检验笔记】第10章 细菌形态学检查法

    重点注意两点:进行不同检测是的材料和结果怎么观察

    细菌的形态:球菌(球形、豆形、肾形及其特殊排列状态)、杆菌(球杆状、棒状、分支状)、螺旋菌(分弧菌、螺菌)

    细菌特殊结构(包括4大种):荚膜(不容易着色,用特殊染色)、菌毛(常规检测看不到)、鞭毛(常规染色也看不到,鞭毛染色可以看到)、芽孢(不着色)

    普通光学显微镜:以自然光或灯光为光源,显微镜的最大分辨率为波长的一半即0.25um,而肉眼所能看到的最小成像是0.2mm,显微镜将油镜放大1000倍,把0.25um放大成0.25mm,固显微镜下一般的细菌都可以清楚的看到。

    暗视野显微镜:用特制的暗视野集光器代替普通光学显微镜上的明视野集光器,由于暗视野集光器中央为不透明的遮光板,光线不能直接射入镜筒,估背景视野黑暗无光,而从暗视野集光器四周边缘斜射到标本部位的光线,经菌体散射后进入物镜。故在强光照射下可以看到发亮的菌体,敏感反差明显,多用于检查不染色的活体菌或螺旋体的形态和运动。

    :1

     

    相差显微镜:主要用于观察活体菌的形态及其内部结构,原理:利用相差板的光栅作用,改变直射光的光相和振幅,将光相的差异转换成光强度的差异,使细菌中某部分结构比其他部分深暗,衬托出鲜明的对比。

    荧光显微镜:用于细菌、病毒的诊断和鉴别,原理:以高压汞灯产生的紫外光或蓝紫光为光源,能激发荧光物质发光使之成为可见光,细菌经荧光物质(或荧光素标记的物质)染色后,镜下可激发荧光,故可在暗视野下看到被激发产生荧光的病原体。

    电子显微镜:可以放大数万甚至数十万倍,能分辨1nm物体,用于清楚观察细菌表面结构和细菌内部超微结构【投射电子显微镜用于观察细菌内部的超微结构,扫描电子显微镜用于观察细菌表面结构及其附件】,原理:以电子流代替光源,电磁圈代替普通显微镜的光学放大系统。

    不染色标本:主要观察动力、运动情况【注意区分真正的动力和无动力菌布朗运动式的颤动】

    不染色标本检查方法:悬滴法、压滴法、毛细管法(检查厌氧菌的动力)。

    染色标本的检查:染色性、形态、大小、排列、特殊结构(荚膜、芽孢、鞭毛)、异染颗粒

    在接近中性的环境中的细菌都带负电,革兰氏阳性菌等电点2-3,革兰氏阴性菌等电点4-5,故常用碱性染料(如美蓝,结晶紫、碱性复红),酸性染料多用于染色细胞浆。

    常用染色方法:

    【单染色方法】–不能显示各种细菌染色性的差异

    【复染色方法】

    ———-革兰氏染色

    意义:鉴别细菌、选择用药参考(革兰氏阳性和阴性菌对不同的抗生素敏感性不同)、与致病性有关(大多革兰氏阳性菌产外毒素致病,大多革兰氏阴性菌崩解之后才产内毒素致病)

    ———-抗酸染色(分枝杆菌—–多用于结核杆菌和麻风杆菌)

    ———-荧光染色:主要用于结核、麻风、白喉、志贺菌检测

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