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    产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌(CRE)

    phenotypic(表型)表现出对carbapenem ( 碳青霉烯;)英[kɑ:bæ’penem] 美[kɑ:bæ’penem],就可以报告CRE,

    科普小记:产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌(CRE),[最敏感指标:ETP(厄他培南)-R],通常会表现出对一种或多种碳青霉烯类药物中介或耐药,同时会对头孢三代亚类中的头孢哌酮Cefperazone-Sulbactam(CSI/SCF:头孢哌酮舒巴坦)、头孢噻肟Cefotaxime Sodium(CTX)、头孢他啶(Ceftazidime,Fortum)(CAZ)、头孢唑肟Ceftizoxime(英文别名Ceftizox、CeftizoximeSodium)、头孢曲松(ROC)中的一种或多种耐药。

    【肠杆菌科细菌】:埃希、沙门、志贺、克雷伯、肠杆菌属(产气、阴沟、阪崎肠杆菌)、沙雷、哈夫尼亚、枸橼酸、爱德华、耶尔森、变形、普罗威登、摩根、劳特、泛菌属。

    CRE确证试验有2种:

    CRE确证试验1、MHT法:用肉汤或生理盐水制备0.5麦氏标准的 CTCCS25922 的E.coli菌悬液,再用肉汤或生理盐水1:10稀释后接种MH Agar,干燥3-10min,然后在平板上放置1片10ug的ETP(厄他培南)纸片或10ug的MEN(美罗培南),大的平板放置4片10ug的ETP(厄他培南)纸片或10ug的MEN(美罗培南),然后用10ul接种环跳去Blood Agar上过夜生长的3-5个试验菌落或QC菌株,从纸片边缘向外划直线至少20-25mm长,30℃培养16-20小时,检查MHA,如果抑菌圈与实验菌株或QC菌株划线交叉处出现增强生长现象,则判断试验菌株或QC菌株产碳青霉烯酶阳性,无增强生长判为碳青霉烯酶阴性。

    结果备注:

    (1)目前还没有MHT用于检测非发酵GNR产碳青霉烯的资料

    (2)没些试验菌株可产生抑制ATCC25922生成的物质,当出现此种情况时,在这些菌株的划线两侧可见清洗的抑制生长区,对于这样的分离株,MHT试验不能解释结果(见下图)。

                   (3)不是所有产碳青霉烯酶肠杆菌科菌株均是MHT阳性,而在非产碳青霉烯酶所致碳青霉烯耐药机制的分离株中也可以出现MHT阳性结果。

    (4)QC菌株:

    阳性:肺炎克雷伯菌 ATCC BAA-1705-MHT阳性;

    阴 性:肺炎克雷伯菌 ATCC BAA-1706-MHT阴性;

    (5)MHT阳性菌株且ETP MIC2-4ug/ml或IPM MIC2-8ug/ml或MEM MIC2-8ug/ml时,应报告对所有碳青霉烯类药物耐药。

    (6)变形杆菌、普罗威登菌、摩根菌能通过非产碳青霉烯酶机制提高对IPM MICs值,因此用IPM MIC筛选试验检测碳青霉烯酶方法不适用于这3个菌属。IPM纸片扩散试验筛选所有肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶能力也较差。

    CRE确证试验2:

    当IPM≤23mms时,怀疑CRE,将0.5麦氏标准的菌悬液涂布MHA,贴以下6张纸片:(1)IPM;(2)IPM+10ul无菌水;(3)IPM+10ulEDTA;(4)IPM+10ul Botacic Acid(硼酸);(5)空白纸片(如果无空白纸片可用AMP)+10ul EDTA;(6)空白纸片(如果无空白纸片可用AMP)+10ul Boracic Acid(硼酸),然后35℃过夜培养。

    结果判断:d{IPM+10ul EDTA}-d{IPM}≥5mm或d{IPM+10ulBoracic Acid}-d{IPM}≥5mm时,判断为CRE。

    此方法的解释备注:

    1)CRE必定先是ESBL;

    2)怀疑CRE时,要同时做IPM、MEM、ETP三种药敏纸片,MEN、ETP的操作同IPM。

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