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发布时间:2016/12/20 临床检验 最新文章 标签:carbapenemCAZCefotaxime SodiumCefperazone-SulbactamCeftazidimeCeftizoxCeftizoximeCeftizoximeSodiumCRECRE确证试验CSI/SCFCTXETPFortumMHT法phenotypicROC产气产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌克雷伯劳特厄他培南变形哈夫尼亚埃希头孢他啶头孢哌酮头孢哌酮舒巴坦头孢唑肟头孢噻肟头孢曲松志贺摩根普罗威登枸橼酸沙门沙雷泛菌属爱德华碳青霉烯耶尔森肠杆菌属肠杆菌科细菌表型阪崎肠杆菌阴沟浏览次数:2032 欢迎阅读!
phenotypic(表型)表现出对carbapenem ( 碳青霉烯;)英[kɑ:bæ’penem] 美[kɑ:bæ’penem],就可以报告CRE,
科普小记:产碳青霉烯酶肠杆菌科细菌(CRE),[最敏感指标:ETP(厄他培南)-R],通常会表现出对一种或多种碳青霉烯类药物中介或耐药,同时会对头孢三代亚类中的头孢哌酮Cefperazone-Sulbactam(CSI/SCF:头孢哌酮舒巴坦)、头孢噻肟Cefotaxime Sodium(CTX)、头孢他啶(Ceftazidime,Fortum)(CAZ)、头孢唑肟Ceftizoxime(英文别名Ceftizox、CeftizoximeSodium)、头孢曲松(ROC)中的一种或多种耐药。
【肠杆菌科细菌】:埃希、沙门、志贺、克雷伯、肠杆菌属(产气、阴沟、阪崎肠杆菌)、沙雷、哈夫尼亚、枸橼酸、爱德华、耶尔森、变形、普罗威登、摩根、劳特、泛菌属。
CRE确证试验有2种:
CRE确证试验1、MHT法:用肉汤或生理盐水制备0.5麦氏标准的 CTCCS25922 的E.coli菌悬液,再用肉汤或生理盐水1:10稀释后接种MH Agar,干燥3-10min,然后在平板上放置1片10ug的ETP(厄他培南)纸片或10ug的MEN(美罗培南),大的平板放置4片10ug的ETP(厄他培南)纸片或10ug的MEN(美罗培南),然后用10ul接种环跳去Blood Agar上过夜生长的3-5个试验菌落或QC菌株,从纸片边缘向外划直线至少20-25mm长,30℃培养16-20小时,检查MHA,如果抑菌圈与实验菌株或QC菌株划线交叉处出现增强生长现象,则判断试验菌株或QC菌株产碳青霉烯酶阳性,无增强生长判为碳青霉烯酶阴性。
结果备注:
(1)目前还没有MHT用于检测非发酵GNR产碳青霉烯的资料
(2)没些试验菌株可产生抑制ATCC25922生成的物质,当出现此种情况时,在这些菌株的划线两侧可见清洗的抑制生长区,对于这样的分离株,MHT试验不能解释结果(见下图)。
(3)不是所有产碳青霉烯酶肠杆菌科菌株均是MHT阳性,而在非产碳青霉烯酶所致碳青霉烯耐药机制的分离株中也可以出现MHT阳性结果。
(4)QC菌株:
阳性:肺炎克雷伯菌 ATCC BAA-1705-MHT阳性;
阴 性:肺炎克雷伯菌 ATCC BAA-1706-MHT阴性;
(5)MHT阳性菌株且ETP MIC2-4ug/ml或IPM MIC2-8ug/ml或MEM MIC2-8ug/ml时,应报告对所有碳青霉烯类药物耐药。
(6)变形杆菌、普罗威登菌、摩根菌能通过非产碳青霉烯酶机制提高对IPM MICs值,因此用IPM MIC筛选试验检测碳青霉烯酶方法不适用于这3个菌属。IPM纸片扩散试验筛选所有肠杆菌科细菌产碳青霉烯酶能力也较差。
CRE确证试验2:
当IPM≤23mms时,怀疑CRE,将0.5麦氏标准的菌悬液涂布MHA,贴以下6张纸片:(1)IPM;(2)IPM+10ul无菌水;(3)IPM+10ulEDTA;(4)IPM+10ul Botacic Acid(硼酸);(5)空白纸片(如果无空白纸片可用AMP)+10ul EDTA;(6)空白纸片(如果无空白纸片可用AMP)+10ul Boracic Acid(硼酸),然后35℃过夜培养。
结果判断:d{IPM+10ul EDTA}-d{IPM}≥5mm或d{IPM+10ulBoracic Acid}-d{IPM}≥5mm时,判断为CRE。
此方法的解释备注:
1)CRE必定先是ESBL;
2)怀疑CRE时,要同时做IPM、MEM、ETP三种药敏纸片,MEN、ETP的操作同IPM。