白细胞直方图解析

随着基础医学的迅速发展，特别是计算机技术的广泛应用，血液分析仪的研制水平不断提高，检测原理不断完善。血液分析仪不但检测速度快，精确度高，操作简便，而且还能提供白细胞、红细胞、血小板的体积分析直方图，以直观反映细胞的大小分布情况，为检验师监控仪器工作状态，判断检验结果提供了强有力的工具。SYSMEX三分类的血液分析仪一般都以电阻抗原理进行白细胞分类，仪器依据大多数正常形态的白细胞细胞在溶血素作用后的大小排列，人为设置了4个辨别线，将白细胞直方图划分三个区域，来辨别小白细胞、中白细胞和大白细胞。

• 白细胞直方图的基本概念

1.电阻抗原理  根据血细胞是非导电的性质，悬浮在电解质溶液中的血细胞颗粒，在通过检测小孔时可引起电阻的变化为基础，对血细胞进行计数和体积测量。

2.直方图定义  以血细胞体积大小为横座标，不同体积的细胞出现的相对频率为纵座标，来描绘细胞群体分布情况的曲线图形称作血细胞直方图。

3.白细胞直方图  在计数白细胞时，要加入溶血素使红细胞破坏，此时白细胞膜受到破坏，细胞浆流失，使白细胞体积大小发现变化，因此需要强调的是在白细胞直方图上细胞排列的顺序不是细胞的原始大小，而是经溶血液修饰的细胞大小。

图1，加入溶血素前的细胞大小

二．白细胞分类原理

（一）辨别线的设置

1.低辨别线（LD）： 在30至60fL之间自动寻找最适位置。

2.高辨别线（UD）：固定在300fL ,用作粒度分布的异常监视。

3.辨别线1（T1）： 自动寻找从LD至UD之间白细胞分布曲线的波谷，第一波谷值设为“TROUGH”辨别线1（T1），

4. 辨别线2（T2）： 自动寻找从LD至UD之间白细胞分布曲线的波谷，第二波谷值设为“TROUGH”辨别线2（T2）。

（二）辨别线的作用

1.对正常形态的白细胞进行粒度分类   从以下两图可以直观地看到白细胞分类情况。

WL与T1之间为W-SCR％，相当于LYM%；

T1与T2之间为W-MCR%，相当于MEX%（单核细胞、嗜酸细胞和嗜碱细胞之和，）。T2与WU之间为W-LCR%，相当于NEUT%）。

2.监视白细胞粒度分布的情况，提供异常分布信息

白细胞粒度分布正常时，白细胞直方图显示三峰性分布，在低辨别线（LD）与高辨别线（UD）之间有两个谷值（T1）和（T2）。当谷值辨别线不能设定，或在设定的辨别线位置的度数比规定值高时，将标有白细胞粒度分布异常警号。下面将白细胞分布异常的警号按优先顺序来介绍，当有两个以上的警号符合时，将标上优先顺序最高的警号。

（1）WL：低辨别线（LD）的相对度数超过规定值。可能存在血小板聚集或较多的巨大血小板。

（2）T1：当第一谷值不能决定时。

（3）T2：当第二谷值不能决定时。

（4）F1：小白细胞分布异常。T1的相对度数超过规定值。

（5）F2：中白细胞分布异常。T1或T2的相对度数超过规定值。

（6）F3：大白细胞分布异常。T2的相对度数超过规定值。

（7）WU：高辨别线（UD）的相对度数超过规定值。可能为溶血不充分或存在较多的异常细胞所致。

（8）AG：为小于LD的粒子数超过规定值。可能为血小板聚集所致。对血小板有异常警号。

三．白细胞粒度分布异常实例分析

１．LD度数高：

（1）当LD度数高，存在T1和T2谷值的粒度分布时，WBC的所有参数将标上警号WL。常见于存在红细胞溶血不全，出现有核红细胞，大血小板增多，血小板聚集，纤维蛋白析出等现象时。

（2）当LD高，有T1，没T2的粒度分布分布时，在WBC、LYM%、LYM#结果上标有WL，余分类结果不出现结果，但也有WL警号。

T2警号表示不能设定中间细胞与中性粒细胞之间的波谷鉴别线，常见于出现幼稚粒细胞、红细胞溶血不全，标本放置时间过长等情况。

（3）当LD高，没有T1、T2的粒度分布时，仅出现WBC结果，并标有警号WL，其他分类参数均不输出结果。

（4）黄疸病人的特征性改变：由于黄疸病人红细胞膜上脂质含量增多，蛋白质含量减少，对溶血素的拮抗作用增加，因而使红细胞难于破碎。

2. 没有T1：不输出白细胞分类结果，T1警号表示不能设定淋巴细胞与中间细胞之间的波谷鉴别线，常见于出现幼稚粒细胞、红细胞溶血不全等情况。

（1）没有T1的粒度分布时，除WBC结果输出并无警号外，其他分类参数均标有警号T1，并不输出结果。

（2）没有T1，UD超过规定值   WBC结果输出并标有警号WU，其他分类参数均标有警号T1，并不输出结果。警号WU表示高鉴别线与白细胞直方图曲线交点高，提示存在红细胞溶血不全，出现幼稚粒细胞，白细胞聚集，血小板卫星现象等情况。

3. 没有T2

（1）T1高，T2没有的粒度分布：WBC结果无警号，LYM％、LYM#结果标有警号F1，余参数不输出结果，但标有警号T2。警号F1表示T1鉴别线位置上相对度数超过预定值。常见于存在幼稚粒细胞，单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞增高，红细胞溶血不全，标本放置时间过长等情况。

（2）T1高，T2没有的粒度分布，UD高：WBC结果标有警号WU，LYM％、LYM#结果标有警号F1，余参数不输出结果，但标有警号T2。

（3）T1正常，没有T2的粒度分布：WBC、LYM％、LYM#结果无警号，余参数不输出结果，但标有警号T2。

（4）T1正常，没有T2的粒度分布，UD高：WBC结果标有警号WU，LYM％、LYM#结果无警号，余参数不输出结果，但标有警号T2。

4. T1高

（1）仅T1高的粒度分布时：WBC、GRAN％、GRAN#结果无警号，LYM%、LYM#结果标有警号F1，MXD％、MXD％结果标有警号F2。警号F2表示T1或T2鉴别线位置上相对度数超过预定值。常见于存在原始细胞、幼稚粒细胞，单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞增高，红细胞溶血不全，标本放置时间过长等情况。

（2）当T1高，UD高时：WBC结果标有警号WU， LYM%、LYM#结果标有警号F1，MXD％、MXD％结果标有警号F2，GRAN％、GRAN#结果标有警号F3。

（3）T1高，T2高时：WBC结果没有警号， LYM%、LYM#结果标有警号F1，MXD％、MXD％结果标有警号F2，GRAN％、GRAN#结果标有警号F3。

（4）T1高，T2高，UD高：WBC结果标有警号WU， LYM%、LYM#结果标有警号F1，MXD％、MXD％结果标有警号F2，GRAN％、GRAN#结果标有警号F3。警号F3表示T2鉴别线位置上相对度数超过预定值。常见于存在幼稚粒细胞，单核细胞、嗜酸性细胞、嗜碱性细胞增高，红细胞溶血不全，标本放置时间过长等情况。

5. T2高

（1）仅T2高的粒度分布时：WBC、 LYM%、LYM#结果没有警号，MXD％、MXD％结果标有警号F2，GRAN％、GRAN#结果标有警号F3。

（2）当T2高，UD高时：WBC结果标有警号WU， LYM%、LYM#结果无警号，MXD％、MXD％结果标有警号F2，GRAN％、GRAN#结果标有警号F3。

6. UD高：WBC结果标有警号WU，余参数的结果都没有警号。

（7）LD以下的粒子数增多：PLT结果标有警号AG。

四．小结

1. 结果不输出： T1负责监视淋巴细胞区域和中间细胞区域，T2负责中间细胞区域和中性粒细胞区域，当白细胞粒度分布的曲线异常，仪器在该分布曲线上找不到谷低T1或T2，或T1、T2同时找不到时，T1和T2辨别线负责监视的细胞群结果就不输出。

2. 引起白细胞直方图异常原因分析

（1）病理因素：白细胞直方图的变化，可反映血液中白细胞群体的改变，但这种变化没有特异性，引起血液学变化的病因不同，但其白细胞直方图的变化相近，因此出现的提示警号就是给检验师的命令，要求我们进行显微镜复查血涂片。

（2）非病理因素：

（a）仪器因素：凡影响细胞脉冲信号的因素，都可以使白细胞直方图发生变化，除血细胞自身体积大小外，其他如仪器的阈值、孔电压和脉冲的增益都与脉冲大小有关。

（b）试剂因素：试剂的性能好坏可直接影响细胞直方图的变化，如稀释液的电导率、渗透压、离子强度；溶血剂的种类、浓度、用量和溶血时间，都会产生干扰，使细胞直方图发生改变，因此应强调使用原装配套的稀释液和溶血剂。另外抗凝剂的种类和浓度也会影响细胞直方图，通常应选用EDTA-K_２，1.5-2.0mg抗凝剂抗凝1.0ml全血。

（c）样本放置时间：一般认为样本应在采集后20分钟至二个小时内检测。若放置时间过短，可能存在血小板没有完全解离、抗凝剂未完全溶解等情况。若放置时间过长，则易引起细胞的变形，尤其是一些免疫功能亢进的病人，其淋巴细胞容易变成异型淋巴细胞，从而使白细胞直方图变形。