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Latest Articles【微生物检验笔记】第17章 细菌检验的商品化和自动化设备
一、常用的微量生化反应系统
(一)Micro-ID系统:主要用于肠杆菌科细菌的鉴定,是一块带有15个反应池的塑料板,每个反应池含有一种生化反应培养基和试剂
(二)API系统(目前较常用的微量生化鉴定系统):塑料板上有20个塑料小杯,每个小杯内含有一种生化反应培养基和指示剂
API系统 | 鉴定范围 |
API-20E | 肠杆菌科细菌 |
API-20NE | 非肠杆菌科细菌 |
API Staph(葡萄球菌) | 葡萄球菌属和微球菌属细菌 |
API Strep(链球菌) | 链球菌属细菌 |
API Coryne(棒状杆菌) | 棒状杆菌属细菌 |
API 50CHB | 芽孢杆菌属等革兰阳性杆菌 |
API NH | 奈瑟菌属、布兰汉菌属和嗜血杆菌属细菌 |
API Canpy | 弯曲菌和。螺杆菌 |
API-20A | 厌氧菌 |
(三)Minitek系统:带12个反应孔的塑料板,包括34中生化反应培养基和指示剂的滤纸片
(四)肠杆菌MB-12E系统:96凹孔塑料板,8排,可同时鉴定8份标本,每排每孔含一中生化反应培养基,每排可提供12项生化反应。
(五)氧化发酵鉴定系统:主要有氧发酵管用于非发酵菌,也可用于气单胞菌等一部分发酵型细菌的鉴定。
二、自动化装置
(一)半自动微生物鉴定和药敏系统
1、VITEK-ATB(Automicrobic系统)
1)原理:将肉眼观察的结果输入电脑,结果与数据库内的结果条目比较,自动得到鉴定结果,ATB敏感试验采用半固体培养基,不同药敏试条含有不同种类抗生素。在24小时内观察有无细菌生长以判断药敏实验结果。
2)操作方法:挑取1至数个纯菌落制备0.5麦氏单位的菌悬液,接种试纸条,经35oC孵育18-24小时,观察结果。
2、Microscan Panel使用测试板和快速接种系统,人工判读后将其结果录入电脑,得出结果。
(二)全自动微生物鉴定和药敏系统
1、VETEK系统:可鉴定各种细菌(包括厌氧菌)、酵母菌及细菌的药敏试验。类型有:Vetek-32、Vetek-60及Vetek Ⅱ(有两种规格)
原理:采用数码鉴定原理,每个鉴定卡有30项反应,每3个反应为一组,可得到一个10位数的数码。Vetek Ⅱ采用快速荧光测定细菌,Vetek 系统有高级专家系统, 对药敏结果进行解释性判读。
2、MicroScan自动微生物分析系统:可鉴定各种细菌(包括厌氧菌)、酵母菌及细菌的药敏试验。类型有WalkAway-40,WalkAway-96。
原理:采用传统的呈色反应法,采用快速荧光法测定细菌。药敏部分采用比浊法进行测定。鉴定板有普通和快速两种,后者采用敏感的荧光底物进行酶学方法分析。
【如下为血培养系统】
三、半自动血培养仪:BACTECA60系统专用于快检血液、脑脊液、胸水及其他正常无菌体液中的细菌。
原理:将待测标本接种于含14C-底物的培养瓶中,活菌将利用14C标记底物而产生14CO2,测定气体量并换算成数值。
培养瓶种类:需氧培养瓶、厌氧培养瓶、L型菌培养瓶、结核菌药敏瓶
缺点:放射性废弃物的处理比较困难。
四、全自动培养仪:软件功能全,操作简便,具有数据联网共享功能;培养瓶放入仪器后即开始连续孵育、轻度振荡培养和自动检测的全自动过程。
1)BACTEC9000系列:包括9240型(240瓶)、9120型(120瓶)、和9050型(50瓶)三种
原理:利用荧光探测技术(荧光增强法),全自动连续检测培养瓶内微生物代谢引起的CO2 浓度变化,而CO2 浓度的变化可直接激活培养瓶底部包埋的对CO2 浓度变化高度敏感荧光物质,在二极管的激发下荧光物质释放荧光,荧光强度变化可直接反应培养瓶内CO2 浓度变化,以判定是否有微生物生长繁殖,仪器每十分钟进行一次质控校正,由仪器判断细菌培养阴阳性,阳性者发出警报,
培养瓶:需氧培养瓶、厌氧培养瓶、儿童瓶、真菌培养瓶、分枝杆菌培养瓶
2)Bact/Alert系统:全自动微生物培养和检测系统,有120瓶和240瓶两种规格。
原理:培养瓶底部有特殊的Novel CO2 感应器,有半渗透性薄膜,将培养基与感应器隔离,只有CO2 能通过薄膜。当有微生物生长释放出CO2 可渗透至感应器,pH值改变使其颜色也改变。仪器每十分钟自动检测一次,有电脑分析判断阴阳性,阳性则发出警报。
培养瓶:需氧培养瓶、厌氧培养瓶、小儿培养瓶、抗生素中和瓶。
3)VITAL :有VITAL和mini-VITAL两种规格,
原理:仪器采用荧光法(荧光递减)全自动检测,每隔15分钟读取每一瓶的荧光读数, 自动处理数据,当荧光的光度与对应时间的曲线出现明显倾斜时,检出阳性血培养瓶。
培养瓶:需氧培养瓶、厌氧培养瓶。